正确打开MSC培养方式:MSC NutriStem无血清系列产品



1.MSC Nutristem XF + PLTGold


长久以来,我们都知道当组织受伤的时候,血小板会很快地聚集在伤口附近形成血液凝块,堵住伤口,发挥止血的功能。然而,近年来
许多的研究证实,血小板还具备另一重要功能–帮助我们调节体内的新陈代谢,促进组织的修复与愈合。

血小板:我不只有止血功能噢!

血小板是一种叫做巨核细胞(Megakaryocyte)的细胞质小碎片彼此黏附在一起所形成的,寿命约7~14天,每天约更新总量的1/10。
虽然血小板没有细胞核,但含有来源于巨核细胞的mRNA,能转录并独立进行蛋白合成;在正常的状态下,血小板外形像平滑的小圆
盘(下图左);被激活时,外形就变成了海胆的样子,上面长满了很多突起小刺(下图右),这时候血小板内部的诱导物质会因血小
板活化而被释放出来,开始刺激微血管生长、促进伤口愈合,这些物质就是所谓的生长因子(如PDGF,TGF-β,VEGF,EGF和IGF等)。


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平滑的小圆盘(未活化)▲                      海胆状血小板(已活化)▲


血小板跟间充质干细胞培养有什么关系?

近年来,许多学者针对干细胞(Stem Cells)做深入的研究,证实了多种干细胞的细胞膜上,有上述生长因子的接受体,当这些生长因子和干细胞的细胞膜上的接受体结合后,会启动细胞内的信号传导途径,引起基因序列的表达,诱导mRNA转录,进而合成各种蛋白,促进干细胞增殖。而间充质干细胞在人体组织中比例较低,若要达到临床治疗所需细胞数量,就必须要进行体外大规模扩增,而血小板会释放生长因子的特性,能完美的帮助我们完成这个任务。

如何从血液中取到足够的血小板呢?

想要搜集足够的血小板,最简单的方式就是制备“富血小板血浆(Platelet Rich Plasma,PRP)”,就是将全血通过梯度离心后而得到的血液制品,换句话说就是血小板的浓缩物(血小板浓度由20万颗/ml,提升到100万颗/ml),但其中依然含有大量细胞碎屑,若直接应用在细胞培养中会有较强的免疫原性,因此诞生了PLTGold®人源血小板裂解物(Human Platelet Lysate,HPL)这个新一代富血小板生长因子细胞培养添加剂。

什么是血小板裂解物?

前述所说的生长因子大多存在于血小板内部的α颗粒中,当血小板被活化后会产生脱颗粒作用(即血小板的α颗粒会和细胞膜融合),进而释放大量活化的生长因子。而PLTGold®人源血小板裂解物就是直接将人类来源血小板细胞经过连续的反复冻融裂解后,进一步提纯这些血小板脱颗粒的商品;PLTGold®人源血小板裂解物除了拥有比富血小板血浆更高的生长因子浓度,更用特殊工艺去除了细胞碎片,大幅降低了使用过程中的免疫原性。

PLTGold®人源血小板裂解物怎么使用?

PLTGold®人源血小板裂解物的使用方式非常方便简单,在培养基中(如 a-MEM培养基,BI:01-042-1ACS)添加5%血小板裂解物,混合均匀后即可直接用来培养间充质干细胞,且在传代过程中不需要预包被培养皿。适合应用在多种来源的间充质原代干细胞培养过程呦!


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 ▲ 添加PLTGold®人源血小板裂解物(绿色)的细胞增殖速度,明显大于添加胎牛血清(黄色)或添加AB血清(红色)的实验组。


*BI 真心推荐,以NutriStem® 间充质干细胞无血清培养基搭配PLTGold®人源血小板裂解物使用,间充质干细胞增殖效果更佳。

●优质的血清替代物

●不含肝素或抗凝血剂

●富含贴壁因子,不需包被培养耗材

●有效培养多种来源的MSC,且适用于MSC无血清体系

●适用于培养造血干细胞、iPSC和iPSC衍生细胞、胚胎干细胞、成纤维细胞、内皮细胞、肿瘤细胞等


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▲ PLTGold®人源血小板裂解物搭配BI NutriStem®间充质干细胞完全培养基使用(基础培养基+培养基添加剂,绿色),细胞增殖效果
明显大于(复苏后第四代细胞数可相差至70倍)搭配BI NutriStem®间充质干细胞基础培养基(仅含基础培养基,蓝色)或搭配一般a-MEM
培养基(灰色)。


2. Recombinant Trypsin EDTA Solution 重组胰酶


重组胰蛋白酶EDTA解决方案是一种定义明确的无动物成分的解决方案,旨在有效地从培养表面和组织中解离粘附细胞类型。EDTA组分加速胰蛋白酶的解离作用。该解决方案针对敏感细胞(例如原代人间充质干细胞(hMSC))进行了优化。


●不含动物成分的已定义
●即用型解决方案
●加速酶促作用
●重组胰蛋白酶-无污染蛋白酶
●针对MSC等敏感细胞进行了优化
●与在无血清和含血清的培养基中培养的细胞兼容



3. D10无血清冻存液

NutriFreez®D10冷冻保存培养基是一种即用型,无动物成分,无血清和无蛋白质的细胞冷冻溶液,已针对多种细胞系进行了优化。在
无血清环境中培养细胞时,在冷冻保存过程中也必须保持无血清条件。  
已证明NutriFreez®D10冷冻保存培养基在冷冻和解冻后可获得较高的细胞存活率,增殖,粘附(在相关系中)以及生物活性/表达。与
含血清的冷冻培养基以及竞争的无血清产品相比,均获得了优异的结果,这使其成为含血清和无血清应用的理想产品。
与含血清冻存体系可无缝衔接,提高细胞存活率,增强细胞活性
即用型,只需沉淀细胞并重悬在冻存液中即可。无需添加其他组分。
通用型冻存液,适合各种干细胞,珍贵细胞,单细胞等

NutriFreez®D10培养基已成功用于许多细胞类型,包括但不限于:人间充质干细胞(hMSC)来自各种来源骨髓(BM-MSC),脂肪组
织(AT-MSC),脐带组织(UC -MSC)和牙髓组织(DP-hMSC)
人类胚胎干细胞(hESC),诱导多能干细胞(iPSC),
人类外周血单核细胞(PBMC),人类内皮细胞(EC),
T细胞,包括嵌合抗原受体(CAR-T)细胞和肿瘤浸润淋巴细胞(TIL),
神经元,星形胶质细胞,杂交瘤,CHO细胞,Vero细胞
多种哺乳动物细胞系,包括:MRC-5,HEK-293,HepG2,HeLa,BSC -1,BGM,3T3,MA-10,BHK-21以及其他极其敏感的细胞类型

特点

●防冻配方,旨在最大程度降低脱水效果
●有效维持细胞活力,重贴壁和生物活性
●保持干细胞多能性,正常的核型,和解冻后的增殖力
●即用型解决方案,操作简单
●无动物成分,无血清,无蛋白质的溶液
●适合临床样本  已取得FDA获批DMF

*NutriFreez®是根据cGMP和美国FDA IVD部分864.9225生产的,用于体外诊断的细胞冷冻设备和试剂。它在欧洲列为CE IVD I类,因
此符合根据ISO 13485 QMS制造并符合适用的cGMP准则的欧洲体外诊断设备指令(98/79 / EC)的要求。


4.MSC分化:MSCgo™成骨/成脂/成软骨诱导分化试剂

MSCgo™成骨诱导分化试剂
MSCgo™ Osteogenic Differentiation Medium间质干细胞成骨诱导分化培养基,无血清,无异源,即用型完全培养基,诱导hMSC分化为
成熟成骨细胞。适用于不同来源的hMSC,如骨髓、脂肪组织和脐带组织(hMSC-BM,hMSC-AT,hMSC-CT)。
MSCgo™ Rapid Osteogenic Differentiation Medium 10天以内快速诱导成骨,而MSCgo™ Osteogenic Differentiation Medium需
要14-21天。
成骨结果
hMSC分化成骨后会矿化形成钙结节且有钙分泌,所以可以利用茜素红S (Alizarin Red S) 染色检视分化的成骨细胞。不同的细胞来
源(类型、年龄、代数)所得到的分化效果会有差异

MSCgo™成脂诱导分化试剂
MSCgo™Adipogenic Differentiation Medium间充质干细胞成脂诱导分化培养基,无血清,无异源成分,即用型,适用于不同来源
的hMSC,如骨髓、脂肪组织和脐带组织(hMSC-BM,hMSC-AT,hMSC-CT)。
成脂分化后的hMSC会成球状,并且伴随有脂滴累积,该现象可透过倒置显微镜观察。不同的细胞来源 (类型、年龄、代数)所
得到的分化细胞数会有差异。

MSCgo™成软骨诱导分化试剂

MSCgo™ Chondrogenic Differentiation Medium间质干细胞成软骨诱导分化培养基,无血清,无异源成分,即用型,适用于不同来
源的hMSC,如骨髓、脂肪组织和脐带组织(hMSC-BM,hMSC-AT,hMSC-CT)。
 hMSC成软骨分化,细胞会聚集形成3D球状,同时伴随细胞外基质有蛋白聚糖 (Aggrecan) 富集的情形。所以可用Alcian Blue(深蓝
色的含铜染料)染色检验蛋白聚糖,作为成熟软骨形成的指标。不过染色的强度会因不同hMSC来源(类型、年龄、代数)而有差异。


5.MSC染色鉴定:

特别针对MSC分化培养后验证而设计。染色能力强,效果稳定。从固定、染色、漂洗到拍照,均无需另购其他试剂即可完成,使用方便


C37C00150

MSC成骨分化染色试剂盒  茜素红原理

C37A00150

MSC成脂分化染色试剂盒  油红O原理

C37B00150

MSC成软骨分化染色试剂盒  阿尔新蓝

NutriStem干细胞无血清系列产品:


03-073-1B

Accutase
细胞消化液

100ml

-20ºC

03-078-1B

Recombinant Trypsin Solution 
重组胰酶(不含EDTA)

100ml

AMB

03-079-1A

Recombinant Trypsin EDTA Solution 
重组胰酶 (含EDTA)

500ml

AMB

03-079-1B

Recombinant Trypsin EDTA Solution 
重组胰酶 (含EDTA)

100ml

AMB

03-048-1C

Soybean Trypsin Inhibitor 50X Conc., 5mg/ml
大豆胰蛋白酶抑制剂

20ml

-20ºC

05-100-1A

NutriStem® hPSC XF Medium
多能干细胞无血清培养基

500ml

-20ºC

05-100-1B

NutriStem® hPSC XF Medium
多能干细胞无血清培养基

100ml

-20ºC

06-5100-01-1A

NutriStem hPSC XF Medium W/O TGF & FGF
多能干细胞无血清培养基(不含 TGF & FGF)

500ml

-20ºC

05-753-1F

LaminStem™ 521
重组层粘连蛋白

1ml

-20ºC

05-105-1A

NutriStem® V9 XF Basal Medium
多能干细胞V9无血清基础培养基

500ml

-20ºC

05-106-1F

NutriStem® V9 XF Suppl. Mix
多能干细胞V9无血清添加物

1ml

-20ºC

05-754-0002

Vitronectin ACF
无血清玻连蛋白

200µg

-20ºC

01-862-1B

0.5M EDTA solution
EDTA溶液

100ml

AMB

05-202-1A

Nutristem MSC XF Basal Medium without Phenol Red
间充质干细胞无血清基础培养基(无酚红)

500ml

4ºC

05-200-1A

Nutristem MSC XF Basal Medium
间充质干细胞无血清基础培养基

500ml

4ºC

05-200-1A

Nutristem MSC XF Basal Medium
间充质干细胞无血清基础培养基

500ml

4ºC

05-201-1U

Nutristem MSC XF Supplement Mix
间充质干细胞无血清营养添加物

1x3ml

-20ºC

05-752-105

MSC Attachment Solution
间充质干细胞促贴壁试剂(无动物源成分)

0.5ml

4ºC

05-752-1F

MSC Attachment Solution
间充质干细胞促贴壁试剂(无动物源成分)

1ml

4ºC

05-760-1-15

NutriCoat™ Attachment Solution
NutriCoat MSC促贴壁试剂

1.5ml

AMB

05-200-1B

Nutristem MSC XF Basal Medium
间充质干细胞无血清基础培养基

100ml

4ºC

05-201-106

Nutristem MSC XF Supplement Mix
间充质干细胞无血清营养添加物

1x0.6ml

-20ºC

PLTGOLD500R

PLTGold® Human Platelet Lysate
血小板裂解物

500ml

-20ºC

PLTGOLD100R

PLTGold® Human Platelet Lysate
血小板裂解物

100ml

-20ºC

PLTGOLD050R

PLTGold® Human Platelet Lysate
血小板裂解物

50ml

-20ºC

PLTGOLD010R

PLTGold® Human Platelet Lysate
血小板裂解物

10ml

-20ºC

PLTGOLD005R

PLTGold® Human Platelet Lysate
血小板裂解物

5ml

-20ºC

PLTGOLD002R

PLTGold® Human Platelet Lysate
血小板裂解物

2ml

-20ºC

PLTGOLD500RGMP

PLTGold® Human Platelet Lysate(Clinical Grade)
血小板裂解物(临床级)

500ml

-20ºC

PLTGOLD100RGMP

PLTGold® Human Platelet Lysate(Clinical Grade)
血小板裂解物(临床级)

100ml

-20ºC

PLTGOLD050RGMP

PLTGold® Human Platelet Lysate(Clinical Grade)
血小板裂解物(临床级)

50ml

-20ºC

C35010100

MSC ACF Tissue Digestive Mix
AF高效原代干细胞分离液

100ml

-20ºC

C35010020

MSC ACF Tissue Digestive Mix
AF高效原代干细胞分离液

20ml

-20ºC

C35010010

MSC ACF Tissue Digestive Mix
AF高效原代干细胞分离液

10ml

-20ºC

05-713-1A

NutriFreez™ D10 Cryopreservation Medium
NutriFreez™ D10无血清冻存液(无动物源成分)

500ml

4ºC

05-713-1B

NutriFreez™ D10 Cryopreservation Medium
NutriFreez™ D10无血清冻存液(无动物源成分)

100ml

4ºC

05-713-1E

NutriFreez™ D10 Cryopreservation Medium
NutriFreez™ D10无血清冻存液(无动物源成分)

50ml

4ºC

05-714-1A

NutriFreez™ D10 Cryopreservation Medium,  w/o phenol-red
NutriFreez™ D10无血清冻存液(无动物源成分,无酚红)

500ml

4ºC

05-714-1B

NutriFreez™ D10 Cryopreservation Medium,  w/o phenol-red
NutriFreez™ D10无血清冻存液(无动物源成分,无酚红)

100ml

4ºC

05-714-1E

NutriFreez™ D10 Cryopreservation Medium,  w/o phenol-red
NutriFreez™ D10无血清冻存液(无动物源成分,无酚红)

50ml

4ºC

05-752-1H

MSC Attachment Solution
间充质干细胞促贴壁试剂(无动物源成分)

5ml

4ºC

05-220-1B

MSCgo™ Chondrogenic Differentiation Basal Medium
间充质干细胞成软骨诱导分化基础培养基

100ml

4ºC

05-221-1D

MSCgo™ Chondrogenic Differentiation Supplement Mix
间充质干细胞成软骨诱导分化营养添加物

10ml

-20ºC

05-330-1B

MSCgo™ Adipogenic Differentiation Basal Medium
间充质干细胞成脂诱导分化基础培养基

100ml

4ºC

05-331-1-01

MSCgo™ Adipogenic SF,XF Supplement Mix I
间充质干细胞成脂诱导分化营养添加物I

0.1ml

-20ºC

05-332-1-15

MSCgo™ Adipogenic SF,XF Supplement Mix II
间充质干细胞成脂诱导分化营养添加物II

1.5ml

-20ºC

05-440-1B

MSCgo™ Osteogenic Differentiation Medium
间充质干细胞成骨诱导分化试剂

100ml

4ºC

05-442-1B

MSCgo™ Rapid Osteogenic Differentiation Medium
间充质干细胞成骨快速诱导分化试剂

100ml

4ºC

C37A00150

Adipo-dye for adipocytes staining kit in adipogenic differentiation
间充质干细胞成脂分化染色试剂盒

150ml

4ºC

C37B00150

Chondro-dye for chondrocytes staining kit in chondrogenic differentiation 
间充质干细胞成软骨分化染色试剂盒

150ml

4ºC

C37C00150

Osteo-dye for osteocytes staining kit in osteogenic differentiation
间充质干细胞成骨分化染色试剂盒

150ml

4ºC

05-400-1A

EndoGo XF Basel Medium
内皮细胞无血清基础培养基

500ml

4ºC

05-410-1-25

EndoGo XF Supplement  Mix
内皮细胞无血清添加剂

2.5ml

-20ºC


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